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飛舟玻璃--血球計數板的使用方法是什么?

瀏覽: 發表時間:2023-03-22 11:38:39

飛舟玻璃--血球計數板的使用方法是什么?

根據待測菌懸液的濃度,加入無菌水適當稀釋(一般在斜面上稀釋100倍),以每個細胞的細菌數作為度數。

取一個干凈的血細胞計數器,用蓋玻片覆蓋計數區。

將菌懸液搖勻,用滴管取少許,沿蓋玻片下緣從計數板中間平臺兩側的凹槽中滴一小滴(不要太多),讓菌懸液利用液體的表面。張力充滿計數區,以免產生氣泡,并用吸水紙吸去槽內流出的多余菌懸液。也可以將菌懸液直接滴在計數區上(不要讓計數區兩邊的平臺沾上菌懸液,以免加蓋玻片后增加計數區的深度) ,然后蓋上玻璃(不要產生氣泡)。

靜置片刻,讓細胞沉淀在計數板上,不再隨液漂移。將血細胞計數器放在顯微鏡的舞臺上并牢牢夾住。先找到低倍鏡下的計數區,然后切換到高倍鏡下觀察計數。由于活細胞的折射率與水相似,因此觀察時應減弱光強。

計數時,若計數區由16個中間方格組成,則按對角線分別統計左上、左下、右上、右下4個中間方格(即100個小方格)內的細菌數方向。如果是由25個中方格組成的計數區,除了統計上述4個中方格外,還需要統計中央中方格(即80個小方格)的細菌數。為保證計數的準確性,避免重復計數和漏記,計數時落入網格線上的細胞統計應有統一規定。如果細菌位于大格子的雙線,計數時要數上線不數下線,數左線不數右線,以減少誤差。即位于該格子的上行和左行的單元格按規定計入該格子,位于該格子下行和右行的格子計入相應的格子。見右圖:即這個格子中有3個被計數的單元格。

對于出芽酵母,當芽長到母細胞的一半大時,可以算作兩個細菌。每個樣品重復計數2-3次(每次數值不能相差太大,否則需重復操作),按公式計算每mL(g)菌懸液中所含細胞數。

測量完成后,取下蓋玻片,用水沖洗血細胞計數器。請勿用硬物清洗或擦拭,以免損壞網格刻度。洗完后,自己吹干或用吹風機吹干,放入盒子里存放。


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